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极少运用瓜尔胶酶解制备半乳甘露低聚糖

发布日期:2015-08-22 20:08:38
  半乳甘露低聚糖(Galacto-Mannan-Oligosaccharides,GMOS)是国内医药药品界关心的低聚糖新种类,存正在丰盛多样的生感性能。它没有只具有其它非吸引性低聚糖推进无益菌增 殖的性能,并且还是很好的免疫调理剂,正在临床上有调理血糖的作用,正在性能药品上有调 节肠道性能的货物。眼前国际制备甘露低聚糖次要运用魔芋粉停止降解,次要产物是葡甘 露低聚糖,极少运用瓜尔胶酶解制备半乳甘露低聚糖。
  本考题对于瓜尔胶的酶法改性制备半乳甘露低聚糖,并对于酶解液停止精制结合和检测分 析,并经过钻研半乳甘露低聚糖对于鼠李糖乳酸杆菌、动物乳酸杆菌和发酵乳酸杆菌的省外 增殖状况,以及以鲜羊奶为原料药,钻研GMOS正在酸奶中的使用状况,为半乳甘露低聚糖正在 药品、养殖畜牧业粮草和医药等轻工业中使用需要定然的实践根据。随着瓜尔豆胶正在本国的 推行播种,经过对于瓜尔豆胶酶法改性制备存正在性能性的半乳甘露低聚糖,将存正在愈加主要 的实践意思。
  瓜尔胶次要因素是半乳甘露低聚糖。用P-甘露聚糖酶酶解瓜尔胶时,该酶只对于主链上 的P-1,4-糖甘键停止酶切,而对于a-l,6-糖甘键没有起作用,因而酶解产物是带有D-半乳糖侧链 的小成员甘露聚糖。酶解产物的集合度和成员量随酶的增添量和反响工夫而改观,内中聚 合度正在2-10的酶解产物是一种存正在生感性能的低聚糖或者寡糖,称为半乳甘露低聚糖 (GMOS)。本章以瓜尔胶为原料药,采纳p-甘露聚糖酶酶合议制备半乳甘露低聚糖。经过单要素 实验及L9(34)正交实验对于酶解反响环境停止优化和考证,并对于酶解产物停止HPLC检测,旨 正在为货物的轻工业化消费需要参考
  对于酶解率的反应最大,其次是加酶量,反响工夫和量度对于酶解 率率的反应绝对于较小。酶解的最佳环境为A2B3C2D2,即瓜尔胶深浅0.5%,加酶量20U/g, pH 6.0, 50 °C,反响工夫8 h。因为此环境正在正交表中并未列入,故按此环境停止考证,测得其酶解率为24.2%,均匀集合度为4.13,优于正交表中的实验值。
  辨别取甘露糖和甘露二糖规范滤液以及酶解液停止高效液相色谱检测,后果见图2-8。 依据规范品的出峰工夫,甘露糖和甘露二糖规范滤液的保存工夫辨别是3.667和4.234。通 过色谱面积归一化法容量(见表2-4),内中单糖含量为5.56%,甘露二糖及其余糖的含量为 94.44%。Emis等[35]和Shimahara等[36]钻研证实,户甘露聚糖酶作用来魔芋胶或者槐豆胶的作 用位点是多糖链的非复原端的第3或者第4个糖成员。固然没有同起源的户甘露聚糖酶对于底物 的作用深浅没有同,但次要产物是甘露低聚糖,绝对于来说,很少发生单糖。由此可见,甘 露聚糖酶作用来瓜尔胶与魔芋胶、槐豆胶类似,根本没有发生单糖。
  正在酶解反响进程中,黏度为4294 MPa_s的1%瓜尔胶滤液,5 min后黏度降落至4 MPa_s,注明P-甘露聚糖酶能很好的降解瓜尔胶。因为酶解反响能够正在长工夫内迅瓜尔胶的粘度,因而正在轻工业消费上,能够釆用批量增添瓜尔胶的形式,从而失掉深奥浅的 电离液。
  正在单要素试验根底上,经过正交实验肯定酶解制备半乳甘露低聚糖的最佳反响环境为 瓜尔胶深浅0.5%,加酶量20 U/g,pH 6.0, 50 °C,反响工夫8 h。正在此环境下,酶解率为24.2%, 均匀集合度为4.13。内中pH对于酶解率的反应最大,其次是加酶量,反响工夫和量度对于酶解 率率的反应绝对于较小。经HPLC检测,内中单糖含量为5.56%,甘露二糖及其余糖的含量为 94.44%。由此可见,酶解根本没有发生单糖,为下一步结合任务需要了根据。
极少运用瓜尔胶酶解制备半乳甘露低聚糖
 
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